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制备型高效液相色谱仪在天然产物分离中的应用应用详情

天然产物的分离与纯化

天然产物中的成分复杂,有的达到几十种甚至上百种,因此对其化学成分的分离纯化一直以来就是一项很艰巨的工作。可是由于传统的方法不仅步骤繁琐,有机溶剂也消耗过大,而且最终的产率及纯度都很低,所以需要采用一种新型的分离与纯化方法,高效液相色谱法(HPLC)正可以解决这一问题。并且据统计,80%的天然药物宜采用高效液相色谱分析。

 
HPLC分离纯化生物碱类化合物

生物碱是生物体内一类除蛋白质、肽类、氨基酸及维生素B 以外的含氮有机化合物,它们结构复杂且大多有明显的生物活性或毒性,是中草药重要的有效成分。
在生物碱分离制备中,反相制备是制备型高效液相色谱应用很普遍的方法。根据样品的不同其流动相有很大差异,目前紫杉醇的制备是高效液相中比较成熟的应用。  


 
 
HPLC分离纯化生物黄酮类化合物

黄酮类化合物是由两个苯环通过三碳链相互连接而成的,具有C6–C3–C6 15个碳原子基本骨架的一类物质,其广泛分布于各种药用植物中,尤其是花、叶部位,约20%的中草药中都含有黄酮类化合物,资源丰富。目前已知的具有生物活性的黄酮类化合物有很多,其活性主要包括抗心血管疾病、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒等。
结合制备型高效液相色谱仪进行纯化罗布麻花的总黄酮提取物,通过优化流速、样品进样量、洗脱梯度的变化,一次可从罗布麻花中制备分离得到9个黄酮类化合物,纯度均超过90%。该分离技术给天然产物黄酮类的分离、纯化提供了一种直接有效的方法。

HPLC分离纯化生物萜类化合物

萜类化合物是由异戊二烯或异戊烷以各种方式连接而成的天然化合物,具有祛痰、止咳、镇痛等生理活性。
利用高效液相色谱仪从荚果蕨中分离出9 种高纯度的倍半萜类单体化合物,利用高效液相色谱仪,分别对豆荚软珊瑚中二萜类成分进行研究,制备得到6 种半萜类化合物,这些研究都发展了分离纯化生物萜类化合物的分离方法,丰富了萜类化合物的化学成分。



 
HPLC分离纯化生物甾体化合物

甾体类化合物是基本母核为环戊稠多氢化菲的一类天然化合物,其在维持生命、调节性功能、治疗皮肤疾病及控制生育等方面具有重要的生理、药理作用。
利用半制备高效液相色谱仪、硅胶柱色谱和色谱柱,对绯红南五味子茎的化学成分进行研究,可以分离制备出10个甾体化合物。



 
HPLC分离纯化其它类型天然产物

皂苷是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类结构复杂的苷类化合物,一些皂苷类成分有明显的药理作用。
高效液相色谱法能直接对刺身中各皂苷成分进行快速分析,能克服由于皂苷类物质分子内有寡糖链存在、结构复杂且极性大、难挥发、含量低、没有紫外吸收等特点造成的分析鉴别困难。
其他比如香豆素、木脂素、蒽醌类化合物也都可以利用半制备高效液相色谱分离得到纯化。


 

总结

从植物、动物、微生物等天然材料中发现结构新颖且具有药理活性的天然产物并进一步开发成新药,是人类预防和治疗疾病的重要渠道,也是国际天然产物领域关注的研究方向。天然物的组分非常复杂,如中草药中各组分含量多少对药剂作用影响很大。采用高效、高分辨、多功能的分离技术是开展天然产物研究的关键环节之一。近十几年来,制备型高效液相色谱法(HPLC)是天然产物化学研究中应用很普遍、最有效和相关技术发展很快的分离纯化方法,在药物研究领域具有不可替代的地位。


 

展望

采用HPLC不仅能从天然产物中分离得到高纯度的化合物单体,而且产率高,速度快,操作简便,便于收集。但是由于天然产物种类丰富,用HPLC进行提取分离在条件或工艺上还有很多需要摸索和改进。由于天然产物分离纯化的核心目标是从天然生物资源中获取具有生物功能或活性的天然产物,因此建立高效液相色谱分离纯化天然产物的技术集成和样品库,是今后利用高效液相色谱分离纯化研究的发展趋势。作为一种高效的分离纯化技术,HPLC在天然产物分离中具有很广阔的发展与应用前景。