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RNA提取要注意什么?

发布时间:2023-02-27浏览:651

RNA存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。
1、操作中戴口罩和手套
 
2、清洁无尘环境中操作,试验台、移液器要用75%乙醇擦拭消毒,也可使用RNase抑制剂,操作时避免大声喧哗和频繁走动。
 
3、玻璃器皿常规洗涤后,应用0.1%焦磷酸二乙酯(DEPC)浸泡处理,然后再用灭菌双蒸水漂洗几次,高压灭菌去除DEPC,160℃烘烤4h。
 
4、移液器枪头和离心管要经DEPC处理水处理、高压灭菌后使用。
 
5、提取后的总RNA定量后部分用于反转录,剩余RNA样品标记并用封口膜封口后-80℃可保存数月。
 
6、配置0.1PC处理水 DEPC是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,常用浓度为0.1%。1L配方:DEPC 1ml,蒸馏水 1L,摇床过夜,高压灭菌30min。
 
艾塔自主研发的一种先进、快速、高效提取DNARNA和蛋白质的样品处理系统,能将任何来源(包括土壤植物和动物的组织/器官、细菌、真菌、孢子、古生物标本等)的DNARNA的蛋白质进行提取。使用方便,一次可以处理,1-24个样本,可在20秒内完成破碎和裂解,最大限度的避免核酸的降解和蛋白质的解离。高效的振荡,保证样品被全方位地充分破碎。
 
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