高效液相色谱仪操作步骤:1.过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜(0.45um）。2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3.打开HPLC高效液相色谱仪工作站(包括计算机软件和色谱仪，连接好流动相管道，连接检测系统。4.进入HPLC高效液相色谱仪控制界面主菜单，点击manual,进入手动菜单。5.高效液相色谱仪有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口...

②高效液相色谱仪流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至只是由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此，高效液相色谱仪必须泵入纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。...

为了延长高效液相色谱仪泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作：①防止任何固体微粒进入高效液相色谱仪泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。高效液相色谱仪流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore滤膜（0.2µm或0.45µm）等滤器。泵的入口都应连接砂滤...

最后，在高效液相色谱仪中颗粒物的另一个主要来源是输液泵密封垫和进样阀旋转轴的磨损。关于输液泵密封垫的磨损更换有两种不同建议。第一种建议认为，在一般实验室中液相色谱仪输液泵密封垫通常使用寿命为六个月到一年，因此建议半年或一年更换这些密封垫，实验室应基于上述观点制定定期预防性维护计划。另一种建议则认为，液相色谱仪原装密封垫的密封效果最好，更换以后容易引起流动相渗漏。所以，只要不漏液就不要轻易更换密封垫...

任何颗粒物进入高效液相色谱仪仪后都会在柱子入口端被筛板挡住，最后的结果是将柱子堵塞，表现出的特征是仪压力增加并使色谱峰变形。因此，要采取各种预防措施，包括操作步骤和商品仪器自身的各种过滤设计，努力防止或减少颗粒物进入高效液相色谱仪仪中，从而延长仪器和色谱柱的使用寿命，并提高数据的可靠性。在高效液相色谱仪仪中，颗粒物的主要来源有三个途径：流动相、被测样品和仪器仪部件的磨损物。高效液相色谱仪中三个途...

高效液相色谱仪中的第二个颗粒物来源是被测样品。一些实验室在将他们的样品放置在高效液相色谱仪自动进样器盘（或手动进样）以前，所有样品都先通过一个0.45μm针筒式过滤器过滤。这是一个有效除去高效液相色谱仪被测样品中颗粒物的方法。但是这个过程也有一点需要关注：你使用了针筒式过滤器就不可能100%得到通过过滤器的被测样品，总会有或多或少的丢失。丢失来自这样几方面：过滤器滤膜的吸附、过滤器滤出的颗粒...