液相色谱仪的流动相调整非常重要，一般来说，应该考虑以下方面:

一、由强到弱。一般先用90%的乙腈或者水进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。

二 、三倍规则。每减少10%的有机溶剂的量，保留因子约增加3倍，此为3倍规则。调整过程中，注意观察各个峰的分离情况。

三 、粗调转微调。当分离达到一定程度后，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并根据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。

四 、液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此，要求流动相还必须具备如下特点：

1 、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中。

2 、流动相与样品不产生化学反应。

3 、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低压降，延长泵的使用寿命。

4 、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

5 、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

6 、流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

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